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人白介素ELISA试剂盒使用时需要注意哪些要点?

发布时间: 2023-01-17  点击次数: 19次
  人白介素ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素水平。用纯化的人白介素抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素,再和HRP标记的白介素抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。
 
  人白介素ELISA试剂盒使用时需要注意的要点:
 
  1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
 
  2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
 
  3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间较好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
 
  4.请每次测定的同时做标准曲线,较好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请较后乘以总稀释倍数(×n×5)。
 
  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
 
  6.底物请避光保存。
 
  7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
 
  8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
 
  9.本试剂不同批号组分不得混用。
 
  10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
 
  人白介素ELISA试剂盒的计算:
 
  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
 
  试剂盒性能:
 
  1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
 
  2.批内与批见应分别小于9%和11%
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